Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 9293:2012 quy định phương pháp xác định hàm lượng biuret trong phân urê. Đây là một chỉ tiêu chất lượng đặc biệt quan trọng vì biuret là một phụ phẩm phát sinh trong quá trình sản xuất urê, có khả năng gây độc cho cây trồng nếu tồn tại với hàm lượng cao. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung phần mở đầu và các điều khoản đầu (từ Điều 1 đến Điều 4) của tiêu chuẩn này.

Điều 1: Phạm vi áp dụng

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp đo phổ hấp thụ phân tử (phương pháp trắc quang) để xác định hàm lượng biuret trong phân urê.
• Phương pháp này được thiết kế để áp dụng cho các loại phân urê có hàm lượng biuret nằm trong khoảng từ 0,1 % đến 2,0 % tính theo khối lượng.

Điều 2: Tài liệu viện dẫn

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, tài liệu viện dẫn bắt buộc là TCVN 4851 (ISO 3696) - Nước dùng cho phòng thí nghiệm phân tích - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.
• Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).

Điều 3: Nguyên tắc của phương pháp

• Hàm lượng biuret trong mẫu thử được hòa tan hoàn toàn bằng nước ấm ở nhiệt độ không quá 50 độ C nhằm tránh sự thủy phân hoặc chuyển hóa thêm của urê thành biuret trong quá trình chuẩn bị mẫu.
• Trong môi trường kiềm có chứa kali natri tartrat, biuret phản ứng trực tiếp với đồng (II) sulfat để tạo thành một phức chất màu tím đặc trưng (thường gọi là phức đồng - biuret).
• Độ hấp thụ ánh sáng của phức chất màu tím này được đo bằng máy quang phổ hoặc máy đo màu tại bước sóng cực đại nằm trong khoảng từ 540 nm đến 560 nm.
• Hàm lượng biuret trong mẫu được tính toán dựa trên đường chuẩn được xây dựng từ các dung dịch biuret chuẩn có nồng độ đã biết trước.

Điều 4: Thuốc thử và hóa chất

• Trong quá trình phân tích, chỉ sử dụng các hóa chất có cấp độ tinh khiết phân tích và nước dùng trong phòng thí nghiệm phải phù hợp với TCVN 4851 (ISO 3696), tối thiểu phải đạt chất lượng nước loại 3.
• Dung dịch đồng sulfat kiềm (Thuốc thử Biuret): Được chuẩn bị bằng cách hòa tan đồng sulfat ngậm nước (CuSO4.5H2O) và kali natri tartrat ngậm nước (KNaC4H4O6.4H2O) trong nước, sau đó thêm dung dịch natri hydroxit (NaOH) không chứa cacbonat, định mức và lắc đều để tạo môi trường phản ứng tối ưu.
• Dung dịch natri hydroxit (NaOH) 0,1 M: Sử dụng để điều chỉnh độ pH của dung dịch mẫu thử trong quá trình chuẩn bị trước khi tiến hành phản ứng tạo màu.
• Dung dịch chỉ thị màu: Sử dụng methyl đỏ hoặc các chất chỉ thị màu thích hợp khác để kiểm soát và nhận biết môi trường phản ứng của dung dịch.
• Biuret chuẩn: Sử dụng biuret tinh khiết đã được sấy khô ở nhiệt độ 105 độ C đến khối lượng không đổi. Chất này được dùng để chuẩn bị dung dịch gốc biuret chuẩn (nồng độ 1 mg/mL) và các dung dịch làm việc nhằm mục đích xây dựng đường chuẩn phục vụ cho việc so màu.