Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6679:2008 (hoàn toàn tương đương với ISO 10315:2000) là văn bản kỹ thuật quy định chi tiết về phương pháp sắc ký khí nhằm xác định hàm lượng nicotin trong phần ngưng tụ của khói thuốc lá. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung từ Điều 1 đến Điều 4 của tiêu chuẩn này, giúp các phòng thử nghiệm và cơ quan kiểm định nắm rõ quy trình chuẩn bị và nguyên lý thực hiện.

- Điều 1: Phạm vi áp dụng

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký khí để xác định hàm lượng nicotin trong phần ngưng tụ của khói thuốc lá (tổng chất hạt ngưng tụ).
• Phương pháp này được thiết kế để áp dụng đối với các mẫu khói thuốc lá thu được từ việc hút thuốc bằng máy hút thuốc thử nghiệm thông thường theo quy trình chuẩn.
• Tiêu chuẩn cho phép xác định chính xác lượng nicotin, một thành phần hóa học quan trọng ảnh hưởng trực tiếp đến chất lượng và tính chất độc học của sản phẩm thuốc lá.

- Điều 2: Tài liệu viện dẫn

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, việc viện dẫn các tiêu chuẩn liên quan là bắt buộc. Các tài liệu viện dẫn cốt lõi bao gồm:
• TCVN 5078 (ISO 3308): Quy định về máy hút thuốc lá thử nghiệm thông thường, bao gồm các định nghĩa và điều kiện chuẩn cho quá trình hút thuốc.
• TCVN 6680 (ISO 4387): Quy định phương pháp xác định tổng chất hạt và chất ngưng tụ khô không chứa nicotin (NFDPM) bằng máy hút thuốc thử nghiệm thông thường.
• Các tài liệu viện dẫn này đảm bảo tính đồng bộ và chuẩn hóa trong toàn bộ quy trình từ khâu hút thuốc, thu hồi mẫu cho đến khâu phân tích hóa lý.

- Điều 3: Nguyên tắc của phương pháp

• Phương pháp dựa trên nguyên lý hòa tan và phân tách sắc ký khí:
• Phần ngưng tụ của khói thuốc lá (thu được trên bẫy lọc sau quá trình hút thuốc thử nghiệm) được hòa tan hoàn toàn trong một dung môi thích hợp. Dung môi này đã được thêm sẵn một lượng chất chuẩn nội xác định.
• Hàm lượng nicotin trong dung dịch mẫu sau đó được định lượng bằng kỹ thuật sắc ký khí (GC).
• Quá trình phân tách được thực hiện trên cột sắc ký phù hợp, và việc phát hiện nicotin được thực hiện bằng detector ion hóa ngọn lửa (FID) hoặc detector chọn lọc nitơ-phốt pho (NPD).

- Điều 4: Thuốc thử và dung dịch chuẩn

• Tiêu chuẩn yêu cầu nghiêm ngặt về độ tinh khiết của các hóa chất và thuốc thử được sử dụng để đảm bảo độ lặp lại và độ tái lập của kết quả phân tích:
• Dung môi hòa tan: Sử dụng propan-2-ol (isopropanol) có độ tinh khiết hóa học cao (tối thiểu 99%), hạn chế tối đa hàm lượng nước để tránh ảnh hưởng đến quá trình sắc ký.
• Chất chuẩn nội: Có thể lựa chọn các chất như anabasin, n-octadecane hoặc carvon với độ tinh khiết không dưới 99%. Chất chuẩn nội đóng vai trò kiểm soát sai số trong quá trình tiêm mẫu và phân tích.
• Dung dịch chuẩn nội: Được chuẩn bị bằng cách hòa tan chất chuẩn nội vào dung môi propan-2-ol với nồng độ quy định, dùng để pha loãng mẫu và chất chuẩn hiệu chuẩn.
• Nicotin chuẩn: Sử dụng nicotin có độ tinh khiết tối thiểu 98% (hoặc được hiệu chính theo độ tinh khiết thực tế). Nicotin chuẩn cần được bảo quản ở nhiệt độ thấp (từ 0 độ C đến 4 độ C) và tránh ánh sáng trực tiếp để ngăn ngừa sự phân hủy.
• Dung dịch hiệu chuẩn (đường chuẩn): Được chuẩn bị bằng cách pha loãng nicotin chuẩn trong dung dịch chuẩn nội để tạo ra một dãy các dung dịch có nồng độ nicotin khác nhau, bao phủ dải nồng độ dự kiến của mẫu phân tích.