TIÊU CHUẨN VIỆT NAM

TCVN 7748 : 2007

THỰC PHẨM – PHÁT HIỆN CHIẾU XẠ BẰNG KỸ THUẬT LỌC HUỲNH QUANG BỀ MẶT TRỰC TIẾP/ ĐẾM ĐĨA VI SINH VẬT HIẾU KHÍ (DEFT/APAC) – PHƯƠNG PHÁP SÀNG LỌC

Foodstuffs – Detection of irradiated food using direct epifluorescent filter technique/Aerobic plate count (DEFT/APC) – Screening method

Lời nói đầu

TCVN 7748:2007 hoàn toàn tương đương với EN 13783:2002;

TCVN 7748:2007 do Tiểu ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F5/SC1 Thực phẩm chiếu xạ biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

THỰC PHẨM – PHÁT HIỆN CHIẾU XẠ BẰNG KỸ THUẬT LỌC HUỲNH QUANG BỀ MẶT TRỰC TIẾP/ ĐẾM ĐĨA VI SINH VẬT HIẾU KHÍ (DEFT/APAC) – PHƯƠNG PHÁP SÀNG LỌC

Foodstuffs – Detection of irradiated food using direct epifluorescent filter technique/Aerobic plate count (DEFT/APC) – Screening method

CẢNH BÁO – Khi áp dụng tiêu chuẩn này có thể liên quan đến các vật liệu, thiết bị và các thao tác gây nguy hiểm. Tiêu chuẩn này không thể đưa ra tất cả các vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng. Người sử dụng tiêu chuẩn này phải thiết lập các thao tác an toàn thích hợp và xác định các khả năng áp dụng các giới hạn quy định trước khi sử dụng tiêu chuẩn.

1. Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sàng lọc vi sinh vật để phát hiện chiếu xạ đối với thảo mộc và gia vị bằng cách sử dụng kết hợp kỹ thuật lọc huỳnh quang bề mặt trực tiếp (DEFT) với đếm đĩa vi sinh vật hiếu khí (APC). Kỹ thuật kết hợp DEFT/APC không đặc thù cho xử lý chiếu xạ, do đó kết quả dương tính thu được từ phương pháp này cần được kiểm tra và khẳng định lại bằng các phương pháp đã được chuẩn hóa [ví dụ TCVN 7412 (EN 1788), TCVN 7746 (EN 13751) để xác nhận việc xử lý chiếu xạ các mẫu thực phẩm nghi ngờ.

Phương pháp này đã được thử nghiệm thành công trong các phép thử liên phòng thử nghiệm thực hiện trên một số loại thảo mộc và gia vị [1] đến [5].

2. Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau là rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm ban hành thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm ban hành thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi.

TCVN 4884 (ISO 4833), Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi – Phương pháp định lượng vi sinh vật trên đĩa thạch – Kỹ thuật đếm khuẩn lạc ở 30 ^oC.

TCVN 6404 (ISO 7218), Vi sinh vật trong thực phẩm và trong thức ăn chăn nuôi – Nguyên tắc chung về kiểm tra vi sinh vật.

3. Nguyên tắc

Phương pháp này dựa vào sự so sánh số đếm vi sinh vật hiếu khí (APC) với số đếm thu được từ kỹ thuật DEFT. Kỹ thuật APC cho biết số lượng vi sinh vật còn sống trong mẫu sau khi chiếu xạ, còn số đếm thu được từ kỹ thuật DEFT cho tổng số vi sinh vật có trong mẫu, kể cả những tế bào không còn sống. Sự khác nhau về kết quả đếm tổng số vi sinh vật giữa APC và DEFT trên các mẫu gia vị chiếu xạ ở các liều 5 kGy và 10 kGy nằm trong khoảng 3 đến 4 đơn vị log. Những sai lệch tương tự giữa hai kỹ thuật xác định này cũng có thể xảy ra do một số phương pháp xử lý thực phẩm khác, ví dụ xử lý nhiệt làm cho vi sinh vật bị chết dẫn đến kết quả xác nhận là dương tính.

Một lượng mẫu nhất định được lọc qua màng lọc có sự hỗ trợ của áp suất giảm nhằm tập trung các vi sinh vật trên bộ lọc. Các vi sinh vật sẽ được nhuộm màu bằng chất tạo huỳnh quang, phẩm da cam acridin (AO) để tạo huỳnh quang màu cam hoặc cam-vàng khi chiếu sáng với ánh sáng xanh da trời tại bước sóng 450 nm đến 490 nm. Những vi sinh vật này sẽ được đếm dưới kính hiển vi huỳnh quang bề mặt để cho số đếm DEFT. Tuy nhiên, những vi sinh vật đã bị chết trước khi chiếu xạ chỉ phát huỳnh quang xanh lá cây nên không đếm được bằng phương pháp này. Bằng cách tiến hành song song, kỹ thuật đếm APC cũng được thực hiện từ một phần khác của cùng một mẫu thử nghiệm [6] đến [10].

4. Thuốc thử