Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6506-1:2007 (hoàn toàn tương đương với ISO 11816-1:2006) quy định phương pháp đo huỳnh quang để xác định hoạt tính phosphataza kiềm trong sữa và các đồ uống từ sữa. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung Phần mở đầu và các điều khoản đầu tiên từ Điều 1 đến Điều 4 của tiêu chuẩn này:

- Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp đo huỳnh quang để xác định hoạt tính phosphataza kiềm trong sữa nguyên chất, sữa tách béo một phần, sữa gầy và các loại đồ uống từ sữa có hương liệu.
• Phương pháp này có thể áp dụng hiệu quả cho sữa và đồ uống từ sữa có nguồn gốc từ nhiều loài động vật khác nhau như bò, dê, cừu, ngựa và lạc đà.
• Độ nhạy của phương pháp cho phép phát hiện hoạt tính phosphataza kiềm ở mức rất thấp, giúp kiểm tra chính xác hiệu quả của quá trình thanh trùng sữa và phát hiện sự nhiễm chéo giữa sữa chưa thanh trùng với sữa đã thanh trùng.

- Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, việc viện dẫn các tài liệu kỹ thuật liên quan là bắt buộc. Các tài liệu viện dẫn bao gồm các tiêu chuẩn quốc tế và quốc gia về chất lượng nước dùng trong phòng thí nghiệm và dụng cụ đo lường thủy tinh.
• TCVN 4851 (ISO 3696) - Nước dùng cho phòng thí nghiệm phân tích: Quy định các yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với nước tinh khiết sử dụng trong quá trình pha chế hóa chất và tiến hành thử nghiệm.
• Các tiêu chuẩn về dụng cụ thủy tinh đo dung tích (như pipet, bình định mức) nhằm đảm bảo sai số đo lường thể tích nằm trong giới hạn cho phép.

- Thuật ngữ và định nghĩa (Điều 3)

• Hoạt tính phosphataza kiềm (Alkaline phosphatase activity - ALP): Là hoạt tính của enzym phosphataza kiềm có trong mẫu thử, được xác định theo quy trình đo huỳnh quang liên tục được mô tả chi tiết trong tiêu chuẩn này.
• Đơn vị đo hoạt tính: Hoạt tính enzym được biểu thị bằng mili đơn vị trên lít (mU/l).
• Định nghĩa đơn vị hoạt tính (U): Một đơn vị hoạt tính phosphataza kiềm là lượng enzym xúc tác cho sự chuyển hóa của 1 micromol cơ chất (ví dụ: cơ chất fluorogenic) trong thời gian một phút dưới các điều kiện nhiệt độ và pH quy định của phương pháp thử.

- Nguyên tắc của phương pháp (Điều 4)

• Phương pháp dựa trên nguyên lý đo huỳnh quang liên tục để xác định tốc độ phân hủy của một cơ chất không phát huỳnh quang dưới tác động xúc tác của enzym phosphataza kiềm có trong mẫu sữa.
• Cơ chất fluorogenic (thường là dẫn xuất phốt phát không phát huỳnh quang, ví dụ như Fluorophos) được đưa vào phản ứng với mẫu thử ở môi trường kiềm thích hợp.
• Enzym phosphataza kiềm có trong sữa sẽ thủy phân liên kết phốt phát của cơ chất, giải phóng ra một sản phẩm có tính phát huỳnh quang mạnh (ví dụ như Fluoroyellow).
• Cường độ huỳnh quang sinh ra được đo liên tục bằng thiết bị đo huỳnh quang ở các bước sóng kích thích và bước sóng phát xạ đặc trưng.
• Tốc độ gia tăng cường độ huỳnh quang trong một khoảng thời gian xác định tỷ lệ thuận với hoạt tính của enzym phosphataza kiềm hiện diện trong mẫu sữa. Quá trình phản ứng và đo đạc được thực hiện ở nhiệt độ kiểm soát nghiêm ngặt (thường là 38 độ C) để đảm bảo độ lặp lại và độ tái lập tối ưu.