TIÊU CHUẨN VIỆT NAM

TCVN 5284:1990

THỨC ĂN CHĂN NUÔI

PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CAROTEN

Animal feeding stuffs

Method for determination of carotin content

Tiêu chuẩn này áp dụng cho các loại thức ăn chăn nuôi có nguồn gốc thực vật và quy định phương pháp xác định hàm lượng Caroten.

1. Nguyên tắc của phương pháp

Phương pháp dựa trên khả năng hòa tan của Caroten trong các dung môi hữu cơ cho mầu vàng, cường độ mầu của dung dịch tỷ lệ thuận với hàm lượng Caroten và được đo trên máy quang điện hay quang phổ kế ở bước sóng 440 - 450nm. Vì Caroten tinh thể dễ bị oxy hoá trong không khí nên việc chuẩn bị thang chuẩn thường sử dụng dung dịch kali bicromat hay azobenzen.

Trong dung môi hữu cơ (ete petrol hay xăng) không chỉ Caroten mà còn các sắc tố như diệp lục, xanthofin và các chất khác cũng bị hòa tan. Vì thế cần thiết phải tách chúng khỏi Caroten bằng phương pháp sắc ký hấp phụ.

2. Lấy mẫu

Tiến hành lấy mẫu thử theo TCVN 4325-86.

3. Dụng cụ và hoá chất

3.1. Dụng cụ

- Máy cắt mẫu thực vật, bảo đảm phần cắt nhận được có độ dài 1 - 3cm.

- Máy nghiền mẫu trong phòng thí nghiệm

- Máy so màu quang điện có kính lọc màu xanh ứng với bước sóng 440 - 450nm hay quang phổ kế.

- Cân phân tích có độ chính xác đến 0,001g;

- Cân kỹ thuật có độ chính xác đến 0,05g;

- Cối chày sứ

- ống đong dung tích 100ml

- Burét dung tích 50ml

- Bình định mức dung tích 100ml; 1000ml;

- Bình nón có nút mài dung tích 100 - 150; 200ml

- Bình Bunden;

- Dụng cụ có hút chân không;

- Cột hấp phụ (ống Allin) đường kính 2 - 4cm;

- Đũa thủy tinh.

3.2. Hoá chất

- Kali bicromat, TKHH;

- Azobenzen, TKHH;

- Ete petrol hay xăng trắng, TK;

- Oxyt nhôm (khan), TK;

- Oxyt canxi (khan), TKPT;

- Natri sunfat (khan), TKPT;

- Natri bicacbonat, TKPT hay TKHH;

- Cồn etylic 96°;

- Nước cất hay nước có độ tinh khiết tương đương;

Chú thích:

Tất cả các công việc tiến hành với ete phải thực hiện trong tủ hút. Khi bảo quản ete, xăng cũng như khi tiến hành thí nghiệm cần cách ly hoàn toàn với những chất dễ cháy và chất nổ.

4. Chuẩn bị thử

4.1. Chuẩn bị oxyt nhôm có độ ẩm 10%

Thêm 100 ml nước cất vào 900g oxyt nhôm khan và trộn đều. Thuốc thử được bảo quản trong lọ có nút mài và được sử dụng để phân tích không sớm hơn một ngày sau lúc chuẩn bị.

4.2. Chuẩn bị cột hấp phụ (ống Allin).

Đặt vào chỗ hẹp nhất của ống Allin một nút bông hút ẩm và đổ lên đó 4 - 5cm chất hấp phụ - oxyt nhôm có độ ẩm 10%. Dùng đũa thủy tinh dồn nhẹ lớp oxyt nhôm xuống, phủ lên