Giới thiệu chung về Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 5268:2008

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 5268:2008 quy định phương pháp xác định hoạt lực diastaza trong mật ong. Đây là một trong những chỉ tiêu kỹ thuật quan trọng nhằm đánh giá chất lượng, độ tươi tự nhiên cũng như phát hiện việc mật ong đã bị xử lý nhiệt quá mức hoặc bảo quản sai quy cách. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung các điều khoản đầu (từ Điều 1 đến Điều 4) của tiêu chuẩn này.

Điều 1: Phạm vi áp dụng

Điều khoản này xác định giới hạn và đối tượng áp dụng của phương pháp thử:

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hoạt lực diastaza trong các loại mật ong thương phẩm.
• Phương pháp này được áp dụng rộng rãi trong các phòng thử nghiệm, cơ quan kiểm định chất lượng sản phẩm và các doanh nghiệp sản xuất, kinh doanh, xuất nhập khẩu mật ong.

Điều 2: Tài liệu viện dẫn

Để đảm bảo tính chính xác và đồng bộ khi thực hiện thử nghiệm, tiêu chuẩn yêu cầu áp dụng kết hợp với các tài liệu viện dẫn liên quan:

• Các tài liệu viện dẫn bao gồm các tiêu chuẩn quốc gia hoặc quốc tế về phương pháp lấy mẫu mật ong và các yêu cầu chung đối với nước dùng trong phòng thí nghiệm phân tích.
• Trong trường hợp các tài liệu viện dẫn có sự thay đổi, bổ sung hoặc được thay thế bằng văn bản mới, người sử dụng cần áp dụng phiên bản mới nhất của tài liệu đó.

Điều 3: Nguyên tắc của phương pháp

Nguyên tắc xác định hoạt lực diastaza được xây dựng dựa trên cơ chế phản ứng sinh hóa tự nhiên:

• Enzym diastaza (amylaza) có sẵn trong mật ong sẽ phân hủy dung dịch tinh bột (được sử dụng làm cơ chất) dưới các điều kiện nhiệt độ, pH và thời gian được kiểm soát nghiêm ngặt.
• Sau một khoảng thời gian phản ứng xác định, hỗn hợp được cho tác dụng với dung dịch iod để tạo thành phức chất màu xanh đặc trưng.
• Độ giảm cường độ màu của phức chất tinh bột - iod được đo bằng máy quang phổ ở bước sóng quy định để xác định lượng tinh bột chưa bị phân hủy.
• Hoạt lực diastaza được biểu thị bằng số diastaza (số Schade), định nghĩa là số mililit dung dịch tinh bột 1% bị phân hủy bởi enzym diastaza có trong 1 gam mật ong trong thời gian 1 giờ ở nhiệt độ 40 độ C.

Điều 4: Thuốc thử và vật liệu thử

Tiêu chuẩn quy định nghiêm ngặt về chất lượng hóa chất sử dụng, yêu cầu tất cả phải là loại tinh khiết phân tích và nước dùng trong quá trình pha chế phải là nước cất hoặc nước có độ tinh khiết tương đương:

• Dung dịch đệm axetat (pH 5,3): Được pha chế từ hỗn hợp natri axetat và axit axetic để duy trì môi trường pH tối ưu cho hoạt động xúc tác của enzym diastaza.
• Dung dịch natri clorua (NaCl): Được sử dụng để hoạt hóa và ổn định hoạt tính của enzym trong quá trình phản ứng.
• Dung dịch tinh bột: Yêu cầu sử dụng tinh bột hòa tan chất lượng cao. Dung dịch tinh bột phải được chuẩn bị mới và xác định nồng độ chính xác trước khi tiến hành thử nghiệm để đảm bảo tính đồng nhất của cơ chất.
• Dung dịch iod gốc và dung dịch iod loãng: Được pha chế từ kali iodua (KI) và iod tinh thể (I2), đóng vai trò là chất chỉ thị màu để xác định lượng tinh bột còn dư sau phản ứng thủy phân.