Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 13263-1:2020 về Phân bón - Phần 1: Xác định hàm lượng Vitamin A bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao quy định quy trình kỹ thuật chi tiết nhằm phân tích và xác định chính xác hàm lượng Vitamin A trong các sản phẩm phân bón có bổ sung hoạt chất này.

Phạm vi và đối tượng áp dụng

Tiêu chuẩn này áp dụng đối với các cơ quan quản lý nhà nước, phòng thử nghiệm, doanh nghiệp sản xuất, nhập khẩu và kinh doanh phân bón tại Việt Nam. Phương pháp này được thiết kế để xác định hàm lượng Vitamin A (bao gồm retinol và các dẫn xuất hoạt tính của nó) trong nền mẫu phân bón bằng kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).

Nội dung cốt lõi của các điều khoản đầu (Từ Điều 1 đến Điều 4)

1. Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định hàm lượng Vitamin A trong các loại phân bón.
• Phương pháp này đảm bảo độ nhạy, độ đặc hiệu và độ lặp lại cao, đáp ứng yêu cầu kiểm tra chất lượng và chứng nhận hợp quy đối với các sản phẩm phân bón lưu thông trên thị trường.

2. Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Các tài liệu viện dẫn trong tiêu chuẩn này là cơ sở pháp lý và kỹ thuật bắt buộc để thực hiện phép thử. Chúng bao gồm các tiêu chuẩn quốc gia về lấy mẫu phân bón, chuẩn bị mẫu thử và các yêu cầu chung đối với nước dùng trong phòng thí nghiệm phân tích.
• Trường hợp các tài liệu viện dẫn có sự thay đổi hoặc được sửa đổi, bổ sung, áp dụng phiên bản mới nhất của tài liệu đó.

3. Nguyên tắc của phương pháp (Điều 3)

• Mẫu phân bón được đồng nhất hóa và tiến hành chiết xuất Vitamin A bằng dung môi hữu cơ thích hợp. Trong trường hợp cần thiết, mẫu sẽ được xà phòng hóa để giải phóng hoàn toàn Vitamin A từ các dạng liên kết hoặc dạng este hóa (như retinyl acetate, retinyl palmitate) về dạng retinol tự do.
• Dịch chiết sau khi làm sạch và lọc qua màng lọc chuyên dụng sẽ được bơm vào hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
• Quá trình phân tách được thực hiện trên cột sắc ký pha đảo (reversed-phase), sử dụng đầu dò quang phổ tử ngoại - khả kiến (UV-Vis) hoặc đầu dò huỳnh quang (FLD) ở bước sóng phát hiện tối ưu.
• Hàm lượng Vitamin A trong mẫu thử được tính toán định lượng dựa trên đường chuẩn được thiết lập từ các chất chuẩn Vitamin A tinh khiết trong cùng điều kiện phân tích.

4. Hóa chất, thuốc thử và thiết bị dụng cụ (Điều 4)

• Hóa chất và thuốc thử: Yêu cầu sử dụng các hóa chất có độ tinh khiết phân tích cao (loại AR) và dung môi dùng cho HPLC (loại HPLC grade). Chất chuẩn Vitamin A phải có chứng nhận xuất xứ rõ ràng, độ tinh khiết xác định và được bảo quản nghiêm ngặt trong điều kiện tránh ánh sáng trực tiếp và nhiệt độ thấp để ngăn ngừa sự phân hủy quang hóa.
• Thiết bị và dụng cụ: Hệ thống HPLC đồng bộ bao gồm bơm cao áp, bộ tiêm mẫu (tự động hoặc bằng tay), đầu dò UV-Vis hoặc đầu dò huỳnh quang, cột sắc ký pha đảo thích hợp và phần mềm xử lý dữ liệu. Các thiết bị phụ trợ khác gồm có máy lắc, máy ly tâm, bể siêu âm, bộ cô quay chân không và các dụng cụ thủy tinh phòng thí nghiệm đạt tiêu chuẩn đo lường.

Hiệu lực thi hành

TCVN 13263-1:2020 có hiệu lực áp dụng kể từ ngày công bố, đóng vai trò là công cụ kỹ thuật quan trọng giúp thống nhất phương pháp kiểm nghiệm, hỗ trợ công tác quản lý chất lượng phân bón và bảo vệ quyền lợi người tiêu dùng.