Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7139:2018 (hoàn toàn tương đương với ISO 13722:2017) về Vi sinh vật trong chuỗi thực phẩm - Định lượng Brochthrix spp. - Kỹ thuật đếm khuẩn lạc là văn bản kỹ thuật do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. Tiêu chuẩn này quy định phương pháp chuẩn hóa nhằm định lượng các vi sinh vật thuộc chi Brochthrix trong các sản phẩm thuộc chuỗi thực phẩm.

Phạm vi và đối tượng áp dụng

Tiêu chuẩn này được áp dụng rộng rãi đối với các đối tượng sau:

• Các sản phẩm dành cho con người tiêu dùng và các sản phẩm thức ăn chăn nuôi.
• Các mẫu môi trường trong khu vực sản xuất, chế biến và xử lý thực phẩm.
• Đặc biệt tối ưu cho việc kiểm nghiệm các sản phẩm thịt, sản phẩm từ thịt và các loại thực phẩm dễ hỏng được bảo quản lạnh hoặc đóng gói trong môi trường khí quyển điều chỉnh (MAP) hoặc đóng gói chân không.

Nội dung cốt lõi của các điều khoản đầu (Điều 1 đến Điều 4)

Dưới đây là phân tích chi tiết các quy định nền tảng từ Điều 1 đến Điều 4 của Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7139:2018:

- Điều 1: Phạm vi áp dụng (Scope)

• Xác định phương pháp định lượng vi sinh vật thuộc chi Brochthrix bằng kỹ thuật đếm khuẩn lạc trên môi trường thạch chọn lọc.
• Phương pháp này cho phép phát hiện và đếm số lượng vi khuẩn Brochthrix spp. (chủ yếu là loài Brochthrix thermosphacta) - một trong những tác nhân hàng đầu gây hư hỏng thực phẩm tươi sống và thực phẩm chế biến sẵn được bảo quản lạnh.

- Điều 2: Tài liệu viện dẫn (Normative references)

• Các tài liệu viện dẫn sau đây là bắt buộc phải áp dụng khi sử dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu ghi năm công bố thì áp dụng bản được nêu; đối với tài liệu không ghi năm công bố thì áp dụng bản mới nhất:
• TCVN 6404 (ISO 7218), Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Yêu cầu chung và hướng dẫn kiểm tra vi sinh vật.
• TCVN 8128 (ISO 11133), Vi sinh vật trong thực phẩm, thức ăn chăn nuôi và nước - Chuẩn bị, sản xuất, bảo quản và thử hiệu năng của môi trường nuôi cấy.

- Điều 3: Thuật ngữ và định nghĩa (Terms and definitions)

• Brochthrix spp.: Được định nghĩa là nhóm vi khuẩn hình thành các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường chọn lọc thạch streptomycin sunfat-thallous axetat-actidion (STAA) dưới các điều kiện nhiệt độ và thời gian quy định trong tiêu chuẩn này.
• Các khuẩn lạc này sau đó phải được khẳng định thông qua các đặc điểm sinh hóa và hình thái học đặc trưng như: tế bào hình que nhỏ, Gram dương (hoặc biến đổi Gram tùy thuộc độ tuổi của khuẩn lạc), không di động, phản ứng catalase dương tính.

- Điều 4: Nguyên lý của phương pháp (Principle)

• Chuẩn bị và cấy mẫu: Tiến hành phân tán một lượng mẫu thử xác định (hoặc dịch huyền phù ban đầu và các độ pha loãng thập phân tiếp theo) lên bề mặt của môi trường nuôi cấy chọn lọc rắn chứa trong các đĩa Petri (sử dụng môi trường thạch STAA).
• Ủ hiếu khí: Các đĩa thạch đã cấy mẫu được tiến hành ủ trong điều kiện hiếu khí ở nhiệt độ ổn định 22 °C hoặc 25 °C trong khoảng thời gian 48 giờ.
• Tính toán kết quả: Thực hiện đếm số lượng khuẩn lạc đặc trưng xuất hiện trên đĩa thạch. Tiến hành các thử nghiệm khẳng định sinh hóa đối với các khuẩn lạc nghi ngờ để xác định chính xác sự hiện diện của Brochthrix spp.. Số lượng Brochthrix spp. trên mỗi gam hoặc mỗi mililít mẫu thử được tính toán dựa trên số lượng khuẩn lạc đã được khẳng định.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7139:2018 (ISO 13722:2017) có hiệu lực áp dụng kể từ ngày được Bộ Khoa học và Công nghệ công bố ban hành, thay thế cho các phương pháp thử nghiệm thủ công hoặc không đồng bộ trước đây đối với chỉ tiêu vi sinh vật này.