Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12602:2018 (hoàn toàn tương đương với EN 15781:2009) về Thức ăn chăn nuôi - Xác định maduramicin-ammonium bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo có tạo dẫn xuất sau cột được công bố bởi Bộ Khoa học và Công nghệ, đưa ra phương pháp chuẩn hóa nhằm kiểm soát hàm lượng chất phụ gia này trong thức ăn chăn nuôi.

Phạm vi áp dụng và đối tượng điều chỉnh

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng maduramicin-ammonium trong thức ăn chăn nuôi và thức ăn bổ sung (premixture) bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) pha đảo kết hợp tạo dẫn xuất sau cột. Phương pháp này được áp dụng cụ thể đối với:

• Các loại thức ăn chăn nuôi hỗn hợp, thức ăn đơn và thức ăn bổ sung có chứa maduramicin-ammonium ở các mức nồng độ đăng ký hoặc giới hạn cho phép.
• Giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp thông thường đạt từ 2 mg/kg đến 20 mg/kg đối với thức ăn chăn nuôi, đảm bảo độ nhạy cao trong việc phát hiện và định lượng chính xác hoạt chất này.

Nội dung cốt lõi của các điều khoản đầu (Từ Điều 1 đến Điều 4)

Dưới đây là phân tích chi tiết các quy định kỹ thuật ban đầu được thiết lập trong tiêu chuẩn:

1. Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Xác định rõ giới hạn đo và khả năng áp dụng của phương pháp HPLC pha đảo có tạo dẫn xuất sau cột đối với maduramicin-ammonium.
• Phương pháp này không chỉ áp dụng cho thức ăn thương mại thành phẩm mà còn áp dụng hiệu quả cho các hỗn hợp premix đậm đặc trước khi phối trộn.

2. Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Các tài liệu viện dẫn là bắt buộc để áp dụng tiêu chuẩn này, bao gồm các tiêu chuẩn về lấy mẫu thức ăn chăn nuôi và chuẩn bị mẫu thử (như TCVN 6952 hoặc các tiêu chuẩn ISO tương đương).
• Việc áp dụng nhất quán các tài liệu viện dẫn đảm bảo tính đồng bộ và độ tin cậy của kết quả phân tích giữa các phòng thử nghiệm khác nhau.

3. Nguyên tắc của phương pháp (Điều 3)

• Chiết tách mẫu: Maduramicin-ammonium được chiết ra khỏi mẫu thức ăn chăn nuôi bằng dung môi hữu cơ thích hợp (thường là hỗn hợp axetonitril và nước hoặc metanol) dưới sự hỗ trợ của thiết bị lắc hoặc bể siêu âm để đảm bảo hiệu suất thu hồi tối đa.
• Lọc và làm sạch: Dịch chiết sau đó được lọc qua màng lọc chuyên dụng hoặc làm sạch qua cột chiết pha rắn (SPE) nếu cần thiết để loại bỏ các tạp chất nền có thể gây nhiễu quá trình phân tích.
• Phân tích sắc ký: Dịch lọc được tiêm vào hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) sử dụng cột pha đảo (C18 hoặc tương đương) để tách maduramicin ra khỏi các thành phần khác.
• Tạo dẫn xuất sau cột và phát hiện: Sau khi ra khỏi cột sắc ký, maduramicin phản ứng liên tục với thuốc thử tạo dẫn xuất ở nhiệt độ thích hợp để tạo thành một phức chất có khả năng hấp thụ quang học hoặc phát huỳnh quang mạnh, từ đó được phát hiện và định lượng bằng đầu dò tương ứng (đầu dò huỳnh quang hoặc đầu dò tử ngoại - UV).

4. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất (Điều 4)

• Hóa chất và thuốc thử: Yêu cầu sử dụng các hóa chất có độ tinh khiết phân tích hoặc cấp độ dùng cho HPLC. Chuẩn maduramicin-ammonium phải có độ tinh khiết rõ ràng và được bảo quản ở điều kiện tiêu chuẩn để tránh phân hủy.
• Thiết bị sắc ký: Hệ thống HPLC phải được trang bị bơm cao áp hoạt động ổn định, bộ tiêm mẫu tự động hoặc bằng tay, cột sắc ký pha đảo phù hợp, hệ thống bơm thuốc thử sau cột (post-column reaction system) có kiểm soát nhiệt độ, và đầu dò phát hiện thích hợp.
• Dụng cụ phòng thí nghiệm: Các dụng cụ thủy tinh thông thường, máy lắc, máy ly tâm, và màng lọc dung môi phải đáp ứng các tiêu chuẩn kỹ thuật khắt khe để tránh nhiễm bẩn chéo.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12602:2018 có hiệu lực kể từ ngày ban hành. Các phòng thử nghiệm và cơ quan kiểm tra chất lượng thức ăn chăn nuôi tại Việt Nam cần áp dụng thống nhất các hướng dẫn kỹ thuật này để đánh giá sự phù hợp của sản phẩm thức ăn chăn nuôi lưu thông trên thị trường.