Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12564:2018 về Thuốc bảo vệ thực vật - Xác định hàm lượng hoạt chất brodifacoum do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC 81 Vy trùng và thuốc bảo vệ thực vật biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. Tiêu chuẩn này hướng dẫn chi tiết phương pháp phân tích hóa học nhằm xác định chính xác hàm lượng hoạt chất diệt chuột brodifacoum trong các sản phẩm kỹ thuật và thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật.

Phạm vi áp dụng và đối tượng áp dụng

• Phạm vi áp dụng: Tiêu chuẩn quy định phương pháp xác định hàm lượng hoạt chất brodifacoum trong thuốc bảo vệ thực vật dạng kỹ thuật (technical grade) và các dạng thành phẩm thương mại lưu hành trên thị trường (đặc biệt là các dạng bả mồi, dung dịch).
• Đối tượng áp dụng: Áp dụng đối với các cơ quan quản lý chất lượng sản phẩm, các phòng thử nghiệm, tổ chức chứng nhận hợp quy và các doanh nghiệp hoạt động trong lĩnh vực sản xuất, nhập khẩu, kinh doanh thuốc bảo vệ thực vật tại Việt Nam.

Nội dung cốt lõi của tiêu chuẩn (Từ Điều 1 đến Điều 4)

1. Nguyên tắc của phương pháp xác định

• Hàm lượng hoạt chất brodifacoum được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
• Quá trình phân tích sử dụng cột phân tích pha đảo để tách biệt hoàn toàn hoạt chất brodifacoum ra khỏi các tạp chất và thành phần phụ gia khác có trong mẫu thử.
• Định lượng hoạt chất được thực hiện bằng detector tử ngoại (UV) ở bước sóng hấp thụ đặc trưng, tiến hành so sánh diện tích pic hoặc chiều cao pic của mẫu thử với mẫu chuẩn có nồng độ đã biết.

2. Thuốc thử và dung môi yêu cầu

• Chất chuẩn: Hoạt chất chuẩn brodifacoum phải có độ tinh khiết cao và đã biết trước hàm lượng cụ thể để làm đối chứng.
• Dung môi: Các dung môi phục vụ cho quá trình chạy sắc ký như axetonitril, metanol, nước cất phải đạt tiêu chuẩn dùng cho HPLC (HPLC grade) để tránh gây nhiễu đường nền hoặc làm hỏng cột phân tích.
• Hóa chất khác: Các axit hoặc muối đệm dùng để điều chỉnh độ pH của pha động phải đạt độ tinh khiết phân tích hóa học cao nhất.

3. Thiết bị và dụng cụ chuyên dụng

• Hệ thống thiết bị sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) được trang bị detector tử ngoại (UV) hoặc detector mảng diod (DAD).
• Cột phân tích pha đảo (thông thường là cột C18 hoặc loại tương đương) có kích thước hạt và chiều dài phù hợp để đảm bảo hiệu năng tách tối ưu nhất.
• Cân phân tích có độ chính xác cao, sai số không quá 0,1 miligam (mg) để cân mẫu chuẩn và mẫu thử nghiệm.
• Các thiết bị hỗ trợ chuẩn bị mẫu bao gồm máy lắc siêu âm (để hỗ trợ quá trình hòa tan và chiết tách hoạt chất), bộ lọc dung môi chuyên dụng và màng lọc mẫu có kích thước lỗ lọc 0,45 micromet.

4. Quy trình chuẩn bị dung dịch phân tích

• Chuẩn bị dung dịch chuẩn: Cân chính xác một lượng chất chuẩn brodifacoum vào bình định mức, hòa tan và định mức bằng dung môi phù hợp để thu được dung dịch chuẩn gốc. Tiến hành pha loãng dung dịch chuẩn gốc để có các dung dịch chuẩn làm việc có nồng độ nằm trong khoảng tuyến tính của thiết bị đo.
• Chuẩn bị dung dịch thử: Đối với mẫu kỹ thuật hoặc mẫu thành phẩm, tiến hành cân một lượng mẫu đại diện đã được đồng nhất hóa hoàn toàn. Sử dụng dung môi thích hợp để chiết tách hoạt chất brodifacoum ra khỏi nền mẫu dưới sự hỗ trợ của bể siêu âm, sau đó lọc qua màng lọc trước khi bơm vào hệ thống sắc ký HPLC.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12564:2018 có hiệu lực áp dụng kể từ ngày được Bộ Khoa học và Công nghệ công bố, đóng vai trò là cơ sở kỹ thuật pháp lý cho việc kiểm tra, giám sát chất lượng các sản phẩm thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất brodifacoum trên thị trường Việt Nam.