Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8318:2010 quy định phương pháp xác định dư lượng hoạt chất chlorothalonil trong các loại rau và quả bằng kỹ thuật sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS). Đây là phương pháp phân tích hiện đại, có độ nhạy và độ chọn lọc cao, giúp kiểm soát an toàn thực phẩm đối với các sản phẩm nông sản lưu thông trên thị trường. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung từ Điều 1 đến Điều 4 của tiêu chuẩn này.

• Tiêu chuẩn này quy định quy trình kỹ thuật để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật chlorothalonil trong các loại rau và quả tươi.
• Phương pháp sử dụng thiết bị sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) nhằm mục đích định lượng chính xác và khẳng định sự có mặt của hoạt chất chlorothalonil trong mẫu thử.
• Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp được thiết lập để đáp ứng các yêu cầu nghiêm ngặt về giới hạn dư lượng tối đa (MRL) theo quy định của pháp luật Việt Nam và các tiêu chuẩn quốc tế.

• Chiết xuất mẫu: Hoạt chất chlorothalonil có trong mẫu rau quả đã được đồng nhất sẽ được chiết xuất ra khỏi nền mẫu bằng dung môi hữu cơ thích hợp (thường là axetonitril hoặc hỗn hợp dung môi có độ phân cực phù hợp) để đảm bảo hiệu suất thu hồi tối đa.
• Làm sạch dịch chiết: Dịch chiết sau khi thu được chứa nhiều tạp chất đồng chiết (như chất béo, sắc tố thực vật, axit hữu cơ). Do đó, dịch chiết cần được làm sạch bằng phương pháp phân bố lỏng - lỏng hoặc đi qua các cột chiết pha rắn (SPE) chuyên dụng nhằm loại bỏ tối đa các chất gây nhiễu trước khi đưa vào thiết bị phân tích.
• Phân tích trên hệ thống GC-MS: Dịch chiết sau khi làm sạch và cô đặc đến thể tích thích hợp được bơm vào hệ thống sắc ký khí ghép khối phổ. Quá trình định tính và định lượng chlorothalonil được thực hiện dựa trên thời gian lưu sắc ký và việc giám sát các mảnh ion đặc trưng của hoạt chất này ở chế độ chọn ion (SIM) hoặc chế độ quét ion toàn phần (Scan).

• Yêu cầu chung: Tất cả các hóa chất, dung môi được sử dụng trong quá trình phân tích phải thuộc loại tinh khiết hóa học hoặc loại chuyên dùng cho phân tích sắc ký (như axetonitril, n-hexan, axeton, toluen, natri clorua khan, natri sunfat khan).
• Chất chuẩn đối chứng: Sử dụng chất chuẩn chlorothalonil có độ tinh khiết đã biết (thường lớn hơn 98%).
• Chuẩn bị dung dịch chuẩn:
  • Dung dịch chuẩn gốc chlorothalonil được pha chế bằng cách hòa tan một lượng chất chuẩn chính xác trong dung môi phù hợp (ví dụ: axeton hoặc toluen) và bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ dưới 4 độ C, tránh ánh sáng trực tiếp.
  • Các dung dịch chuẩn trung gian và dung dịch chuẩn làm việc được pha loãng từ dung dịch chuẩn gốc bằng dung môi thích hợp để xây dựng đường chuẩn phục vụ cho việc định lượng mẫu thực tế.

• Hệ thống sắc ký khí - khối phổ (GC-MS): Thiết bị phải được trang bị buồng bơm mẫu chia tỷ lệ/không chia tỷ lệ (split/splitless), cột mao quản sắc ký khí phù hợp (như cột không phân cực hoặc phân cực nhẹ) có khả năng tách tốt hoạt chất chlorothalonil, và đầu dò khối phổ (MS) hoạt động ở chế độ va chạm electron (EI).
• Thiết bị đồng nhất mẫu: Máy nghiền hoặc máy trộn mẫu có tốc độ cao, đảm bảo mẫu rau quả được cắt nhỏ và đồng nhất hoàn toàn mà không làm thất thoát hoạt chất do sinh nhiệt.
• Thiết bị cô quay chân không hoặc hệ thống thổi khí nitơ: Dùng để cô đặc dịch chiết ở nhiệt độ kiểm soát (thường không quá 40 độ C) nhằm tránh làm phân hủy hoặc bay hơi hoạt chất chlorothalonil.
• Máy ly tâm: Có khả năng đạt tốc độ ly tâm cần thiết để phân tách rõ ràng pha lỏng và pha rắn trong quá trình chiết xuất mẫu.
• Dụng cụ thủy tinh và các thiết bị phụ trợ: Bao gồm bình định mức, pipet tự động, ống đong, phễu lọc, xi lanh lọc mẫu, và các lọ đựng mẫu sắc ký (vial) bằng thủy tinh trung tính tối màu để bảo vệ mẫu khỏi ánh sáng.