Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 9015-1:2011 quy định phương pháp thể tích để xác định hàm lượng canxi và magiê tổng số trong mẫu cây trồng. Đây là tài liệu kỹ thuật quan trọng giúp các phòng thử nghiệm, cơ quan nghiên cứu và đơn vị sản xuất nông nghiệp đánh giá chính xác hàm lượng dinh dưỡng trung lượng trong thực vật.

- Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp thể tích (chuẩn độ EDTA) để xác định hàm lượng canxi và magiê tổng số trong các bộ phận của cây trồng như lá, thân, rễ, quả và hạt.
• Phương pháp này áp dụng cho các loại mẫu cây trồng có hàm lượng canxi và magiê ở mức độ phổ biến, phục vụ công tác đánh giá dinh dưỡng đất, nhu cầu phân bón và chất lượng nông sản.

- Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, cần viện dẫn các tài liệu quan trọng sau:
• TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng cho phòng thí nghiệm phân tích - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.
• Các tiêu chuẩn liên quan đến việc lấy mẫu và chuẩn bị mẫu thử từ cây trồng để đảm bảo tính đại diện và không làm nhiễm bẩn mẫu trong quá trình xử lý cơ học.

- Nguyên tắc của phương pháp (Điều 3)

• Vô cơ hóa mẫu: Mẫu cây trồng sau khi được sấy khô và nghiền nhỏ sẽ được vô cơ hóa bằng phương pháp tro hóa khô (nung ở nhiệt độ cao trong lò nung) hoặc tro hóa ướt (sử dụng hỗn hợp các axit mạnh như axit nitric và axit perchloric) để chuyển hóa canxi và magiê dạng liên kết hữu cơ thành dạng ion tự do trong dung dịch axit.
• Xác định Canxi (Ca): Tiến hành chuẩn độ ion canxi bằng dung dịch tiêu chuẩn EDTA ở môi trường kiềm mạnh (pH từ 12 đến 13) sử dụng chỉ thị màu murexit hoặc calcon. Tại môi trường pH cao này, ion magiê bị kết tủa hoàn toàn dưới dạng magiê hydroxit và không tham gia phản ứng chuẩn độ, cho phép xác định riêng biệt hàm lượng canxi.
• Xác định tổng Canxi và Magiê (Ca + Mg): Tiến hành chuẩn độ đồng thời cả hai ion bằng dung dịch tiêu chuẩn EDTA ở môi trường đệm amoni (pH khoảng 10) sử dụng chỉ thị màu Eriochrome Black T (EBT).
• Tính hàm lượng Magiê (Mg): Hàm lượng magiê tổng số được tính toán gián tiếp dựa trên hiệu số giữa thể tích dung dịch EDTA tiêu tốn khi chuẩn độ tổng canxi và magiê với thể tích EDTA tiêu tốn khi chuẩn độ riêng canxi.

- Thuốc thử, hóa chất và thiết bị dụng cụ (Điều 4)

• Yêu cầu về hóa chất: Tất cả các hóa chất sử dụng phải thuộc loại tinh khiết phân tích (độ tinh khiết hóa học cao). Nước dùng trong suốt quá trình phân tích phải là nước cất hoặc nước có độ tinh khiết tương đương (đạt tiêu chuẩn loại 3 theo TCVN 4851).
• Các thuốc thử chính bao gồm: Dung dịch tiêu chuẩn EDTA (ethylendiamintetraaxetic axit hoặc muối dinatri của nó) nồng độ khoảng 0,01 M hoặc 0,02 M; dung dịch đệm amoni (pH = 10); dung dịch natri hydroxit (NaOH) hoặc kali hydroxit (KOH) để điều chỉnh pH; các chỉ thị màu chuyên dụng (murexit, Eriochrome Black T); các axit mạnh dùng để phân hủy mẫu (HNO3, HClO4, HCl).
• Thiết bị và dụng cụ đo lường: Lò nung kiểm soát được nhiệt độ ổn định (khoảng 550 độ C); bếp điện hoặc hệ thống phá mẫu bằng nhiệt; cân phân tích có độ chính xác đến 0,0001 g; các dụng cụ thủy tinh tiêu chuẩn phòng thí nghiệm bao gồm buret, pipet, bình định mức, cốc mỏ và bình tam giác đã được xử lý sạch bằng axit để tránh nhiễm bẩn ion kim loại hóa trị hai từ môi trường ngoài.