Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8140:2025 (ISO 13493:2021) về Thịt và sản phẩm thịt - Xác định hàm lượng Chloramphenicol - Phương pháp chuẩn quy định các quy trình kỹ thuật nghiêm ngặt nhằm phân tích và xác định chính xác phần khối lượng của dư lượng chloramphenicol trong các mẫu thịt và sản phẩm chế biến từ thịt.

Phạm vi và đối tượng áp dụng

Tiêu chuẩn này được áp dụng đối với các phòng thử nghiệm, cơ quan kiểm nghiệm thực phẩm và các tổ chức, cá nhân thực hiện việc kiểm soát chất lượng, an toàn thực phẩm đối với các sản phẩm thịt và chế phẩm từ thịt nhằm phát hiện dư lượng chất cấm chloramphenicol.

Phương pháp xác định bằng sắc ký pha đảo sử dụng detector cực tím (UV)

Đây là phương pháp chuẩn hóa giúp tách và đo hàm lượng chloramphenicol thông qua các bước xử lý mẫu và phân tích cụ thể:

• Chiết xuất mẫu: Mẫu thử ban đầu được tiến hành chiết bằng nước để hòa tan hoạt chất cần phân tích.
• Tách và làm sạch: Thực hiện quá trình lọc và chiết pha rắn nhằm loại bỏ hoàn toàn các thành phần ưa béo ra khỏi dung dịch nước.
• Rửa giải: Hoạt chất chloramphenicol bám trên cột chiết pha rắn được rửa giải ra ngoài bằng dung môi dichloromethan.
• Tinh sạch sâu: Pha hữu cơ sau khi rửa giải được làm bay hơi, sau đó tiếp tục tinh sạch bằng phương pháp chiết lỏng-lỏng sử dụng hệ dung môi nước và toluen.
• Đo đạc kết quả: Hàm lượng chloramphenicol được xác định chính xác bằng phương pháp sắc ký pha đảo kết hợp với detector cực tím (UV).

Phương pháp xác định và khẳng định bằng LC-MS/MS

Đối với các yêu cầu phân tích có độ nhạy cao và cần khẳng định chắc chắn sự hiện diện của dư lượng chloramphenicol, tiêu chuẩn hướng dẫn quy trình sắc ký lỏng ghép khối phổ hai lần (LC-MS/MS):

• Chiết mẫu và loại tạp chất: Mẫu thử được chiết bằng dung môi ethyl acetat, sau đó tiến hành loại bỏ các thành phần chất béo gây nhiễu bằng n-hexan.
• Làm sạch mẫu: Dịch chiết sau khi loại béo được làm sạch tối ưu bằng cách cho đi qua cột chiết pha rắn cân bằng ưa nước-ưa béo (HLB).
• Phân tích khẳng định: Chloramphenicol được xác định và khẳng định bằng hệ thống LC-MS/MS vận hành ở chế độ theo dõi đa phản ứng (MRM) và hoạt động ở chế độ ion âm.

Định lượng và xử lý dữ liệu phân tích

Việc tính toán kết quả cuối cùng được hỗ trợ bởi các công cụ phần mềm chuyên dụng nhằm đảm bảo tính khách quan và chính xác:

• Phần mềm định lượng của thiết bị LC-MS/MS cho phép xây dựng các khuôn mẫu tùy chỉnh (customized template) để kiểm tra độ tuyến tính của đường chuẩn một cách tự động.
• Hệ thống tự động tính toán tỷ lệ diện tích pic thu được từ các phản ứng chuyển khối để khẳng định sự có mặt hoặc không có mặt của chất phân tích trong mẫu thịt.
• Kết quả phân tích cuối cùng được biểu thị bằng đơn vị microgam trên kilogam (μg/kg).
• Để đảm bảo độ chính xác, giá trị thu được từ mẫu trắng bắt buộc phải được trừ vào kết quả tính toán của mẫu thử theo đúng quy định tại Công thức (2) của tiêu chuẩn.

Hiệu lực thi hành

Hiện tại, các thông tin chi tiết về ngày ban hành, cơ quan ban hành cũng như ngày chính thức có hiệu lực của Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8140:2025 (ISO 13493:2021) chưa được thể hiện cụ thể trong các nguồn dữ liệu trích xuất.