Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 13917-2:2023 về Phát hiện và định lượng thực vật biến đổi gen và sản phẩm có nguồn gốc từ thực vật biến đổi gen bằng phương pháp real-time PCR - Phần 2: Sự kiện ngô chuyển gen MIR 604 được ban hành năm 2023, quy định các phương pháp thử nghiệm nhằm phát hiện và xác định hàm lượng ngô chuyển gen MIR 604 trong các mẫu thực vật và sản phẩm thực phẩm có liên quan.

Phạm vi và đối tượng áp dụng của tiêu chuẩn

Tiêu chuẩn này áp dụng đối với các cơ quan, tổ chức, phòng thử nghiệm thực hiện việc phân tích, kiểm nghiệm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi và các sản phẩm nông nghiệp khác nhằm phát hiện sự hiện diện hoặc định lượng tỷ lệ ngô biến đổi gen sự kiện MIR 604. Đối tượng áp dụng trực tiếp bao gồm các kỹ thuật viên phòng thí nghiệm sinh học phân tử, các cơ quan quản lý chất lượng an toàn thực phẩm và các doanh nghiệp xuất nhập khẩu nông sản.

Các nội dung cốt lõi của tiêu chuẩn TCVN 13917-2:2023

Tiêu chuẩn tập trung vào việc thiết lập quy trình chuẩn hóa quốc gia cho phương pháp real-time PCR đối với sự kiện ngô chuyển gen MIR 604, bao gồm các nội dung chính sau:

• Nguyên tắc của phương pháp: Sử dụng kỹ thuật real-time PCR (phản ứng chuỗi polymerase thời gian thực) để khuếch đại các trình tự DNA đặc hiệu của sự kiện ngô chuyển gen MIR 604. Quá trình khuếch đại được theo dõi trực tiếp thông qua tín hiệu huỳnh quang phát ra từ các mẫu dò (probe) đặc hiệu trong quá trình phản ứng.
• Yêu cầu về thiết bị và dụng cụ: Quy định các trang thiết bị tối thiểu cần thiết cho phòng thử nghiệm sinh học phân tử bao gồm máy real-time PCR, máy ly tâm, máy đo quang phổ hoặc thiết bị đo mật độ quang để kiểm tra chất lượng DNA, và các dụng cụ phụ trợ đạt tiêu chuẩn phòng thí nghiệm.
• Hóa chất và thuốc thử: Sử dụng các cặp mồi (primers) và mẫu dò (probes) đặc hiệu được thiết kế riêng cho việc nhận diện trình tự DNA của sự kiện MIR 604, cùng với các hóa chất phục vụ phản ứng PCR như master mix, nước không chứa nuclease, và các mẫu chuẩn đối chứng dương/đối chứng âm.
• Quy trình thực hiện: Bao gồm các bước chuẩn bị mẫu, tách chiết DNA từ mẫu thử, kiểm tra chất lượng và nồng độ DNA đã tách chiết, thiết lập phản ứng real-time PCR theo chu trình nhiệt quy định, và tiến hành chạy máy.
• Đánh giá và biểu thị kết quả: Hướng dẫn cách phân tích đường cong khuếch đại, xác định giá trị chu kỳ ngưỡng (Ct), đối chiếu với các mẫu kiểm chứng để đưa ra kết luận về sự hiện diện (phát hiện) hoặc hàm lượng phần trăm (định lượng) của ngô chuyển gen MIR 604 trong mẫu phân tích.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 13917-2:2023 có hiệu lực kể từ ngày ban hành theo các quyết định công bố tiêu chuẩn quốc gia của cơ quan nhà nước có thẩm quyền, đóng vai trò là căn cứ kỹ thuật thống nhất cho việc kiểm nghiệm ngô biến đổi gen MIR 604 tại Việt Nam.