TIÊU CHUẨN QUỐC GIA

TCVN 13262-4:2020

THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT – PHẦN 4: XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT NHÓM CITOKININS BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO

Pesticides - Part 4: Determination of cytokinins group content by high performance liquid chromatographic method

Lời nói đầu

TCVN 13262-4: 2020 do Cục Bảo vệ thực vật biên soạn, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT – PHẦN 4: XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT NHÓM CYTOKININS BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO

Pesticides - Part 4: Determination of cytokinins group content by high performance liquid chromatographic method

1  Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng hoạt chất nhóm cytokinins (cytokinin) gồm (zeatin, zeatin riboside, kinetin và benzylaminopurine) trong thuốc bảo vệ thực vật bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao.

Thông tin giới thiệu hoạt chất nhóm cytokinins xem Phụ lục A.

2  Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau là rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi (nếu có).

TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử

3  Nguyên tắc

Cytokinins tổng số được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, sử dụng cột pha đảo (C18) với detector tử ngoại (DAD, MWD, PDA,... hoặc tương đương), ở bước sóng 270 nm. Kết quả định danh được xác định dựa trên sự so sánh giữa thời gian lưu của píc mẫu thử và píc chuẩn. Kết quả định lượng được xác định dựa trên đường chuẩn.

4  Thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích, nước dùng trong quá trình phân tích đạt loại 3 của TCVN 4851 (ISO 3696) hoặc có độ tinh khiết tương đương, sau đây gọi là nước.

4.1  Chất chuẩn zeatin, đã biết hàm lượng, được chứng nhận.

4.2  Chất chuẩn zeatin riboside, đã biết hàm lượng, được chứng nhận.

4.3  Chất chuẩn kinetin, đã biết hàm lượng, được chứng nhận.

4.4  Chất chuẩn benzylaminopurine, đã biết hàm lượng, được chứng nhận.

4.5  Acetonitrile (C₂H₃N), dùng cho sắc ký lỏng.

4.6  Metanol (CH₄O), dùng cho sắc ký lỏng.

4.7  Axit axetic băng (C₂H₄O₂), dùng cho sắc ký lỏng.

4.8  Dung dịch axetic, 0,1 % theo thể tích

Dùng pipet (5.3) lấy 1 ml axit axetic băng (4.7) cho vào cốc dung tích 1000 ml (5.1) có chứa sẵn 1000 ml nước cất. Siêu âm 10 min, để nguội đến nhiệt độ phòng.

4.9  Kali hidroxit (KOH), tinh khiết phân tích.

4.10  Dung dịch kali hidroxit (KOH), nồng độ khoảng 0,05M.

Dùng cân phân tích (5.7) cân khoảng 0,28 gram kali hidroxit (4.9) chính xác đến 0,0001 g vào bình định mức dung tích 100 ml (5.2), hòa tan và định mức tới vạch bằng nước.

4.11  Dung dịch chuẩn gốc

4.11.1  Dung dịch chuẩn gốc zeatin, nồng độ khoảng 1000 mg/l

Dùng cân phân tích (5.7) cân khoảng 0,01 g chất chuẩn cytokinin zeatin, chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 10 ml (5.2), thêm 1 ml dung dịch kali hidroxit 0,05M (4.10) định mức đến vạch bằng metanol (4.6), siêu âm trong 5 min, để nguội đến nhiệt độ phòng.

4.11.2  Dung dịch chuẩn gốc zeatin riboside, nồng độ khoảng 1000