Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10808:2015 quy định phương pháp xác định hàm lượng natri lasalocid trong thức ăn chăn nuôi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Đây là văn bản kỹ thuật quan trọng giúp các phòng thử nghiệm, cơ quan quản lý và doanh nghiệp kiểm soát chính xác hàm lượng chất phụ gia natri lasalocid, bảo đảm an toàn vệ sinh thức ăn chăn nuôi và sức khỏe vật nuôi.

Tiêu chuẩn này quy định chi tiết về phạm vi đối tượng và giới hạn áp dụng của phương pháp phân tích:

• Đối tượng áp dụng: Phương pháp áp dụng đối với các loại thức ăn chăn nuôi, bao gồm thức ăn hỗn hợp, thức ăn đậm đặc và các hỗn hợp premix có chứa natri lasalocid.
• Giới hạn định lượng: Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) trong tiêu chuẩn này cho phép xác định chính xác hàm lượng natri lasalocid ở các mức nồng độ từ vết đến hàm lượng cao trong các sản phẩm thương mại.

Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, cần viện dẫn và kết hợp sử dụng các tài liệu kỹ thuật sau:

• TCVN 6952 (ISO 6498): Thức ăn chăn nuôi - Phương pháp chuẩn bị mẫu thử để phân tích.
• Các tiêu chuẩn quốc gia và quốc tế liên quan đến chất lượng nước dùng trong phòng thí nghiệm phân tích hóa học và các yêu cầu kỹ thuật đối với dụng cụ thủy tinh.

Phương pháp xác định hàm lượng natri lasalocid dựa trên nguyên lý kỹ thuật hiện đại, đảm bảo độ lặp lại và độ thu hồi cao:

• Quá trình chiết xuất: Hoạt chất natri lasalocid trong mẫu thức ăn chăn nuôi được giải phóng và chiết xuất bằng dung môi hữu cơ thích hợp (thường là hỗn hợp methanol và nước hoặc dung môi tương đương) dưới sự hỗ trợ của thiết bị lắc cơ học hoặc bể siêu âm.
• Lọc và làm sạch dịch chiết: Dịch chiết sau khi thu được sẽ được lọc qua màng lọc chuyên dụng (màng lọc xy lanh có kích thước lỗ lọc thích hợp) để loại bỏ hoàn toàn các tạp chất lơ lửng trước khi bơm vào hệ thống sắc ký.
• Phân tích trên hệ thống HPLC: Dịch lọc được bơm vào hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao sử dụng cột pha đảo (thường là cột C18). Quá trình tách sắc ký được thực hiện bằng pha động phù hợp.
• Phát hiện và định lượng: Hàm lượng natri lasalocid được phát hiện bằng đầu dò huỳnh quang (fluorescence detector) hoặc đầu dò tử ngoại (UV detector) ở bước sóng đặc trưng, sau đó tiến hành định lượng dựa trên việc so sánh diện tích pic hoặc chiều cao pic của mẫu thử với đường chuẩn của chất chuẩn natri lasalocid.

Tiêu chuẩn quy định nghiêm ngặt về chất lượng của các loại hóa chất, thuốc thử nhằm bảo đảm tính chính xác của kết quả phân tích:

• Yêu cầu chung: Chỉ sử dụng các hóa chất thuộc loại tinh khiết phân tích và nước dùng cho HPLC hoặc nước có chất lượng tương đương.
• Chất chuẩn: Natri lasalocid chuẩn có độ tinh khiết hóa học đã biết trước để pha chế các dung dịch chuẩn gốc và dung dịch chuẩn làm việc.
• Dung môi và hóa chất pha động: Methanol, acetonitrile, acid acetic băng, nước cất hai lần hoặc các chất đệm hóa học khác được sử dụng để điều chỉnh pH của hệ pha động sắc ký.
• Bảo quản dung dịch chuẩn: Các dung dịch chuẩn gốc và dung dịch chuẩn trung gian phải được bảo quản trong các chai thủy tinh tối màu, đặt trong tủ lạnh ở nhiệt độ tiêu chuẩn để tránh hiện tượng phân hủy quang học và phân hủy nhiệt.