TIÊU CHUẨN VIỆT NAM

TCVN 6686-1 : 2000

ISO 13366-1 : 1997

SỮA – ĐỊNH LƯỢNG TẾ BÀO XÔ MA

PHẦN 1: PHƯƠNG PHÁP DÙNG KÍNH HIỂN VI

Milk – Enumeration of somatic cells

Part 1: Microscopic method

Lời nói đầu

TCVN 6686 - 1 : 2000 hoàn toàn tương đương với ISO 13366 - 1 : 1997

TCVN 6686 - 1 : 2000 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F12 "Sữa và sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn - Đo lường - Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học, Công nghệ và Môi trường ban hành.

SỮA – ĐỊNH LƯỢNG TẾ BÀO XÔ MA

PHẦN 1 : PHƯƠNG PHÁP DÙNG KÍNH HIỂN VI

Milk – Enumeration of somatic cells

Part 1: Microscopic method

Cảnh báo – Khi áp dụng tiêu chuẩn này có thể liên quan đến các chất liệu, thiết bị và các thao tác nguy hiểm. Tiêu chuẩn này không đề cập đến các vấn đề an toàn khi sử dụng chúng. Người sử dụng tiêu chuẩn này phải tự thiết lập các thao tác an toàn thích hợp và xác định khả năng áp dụng các giới hạn quy định trước khi sử dụng tiêu chuẩn.

1. Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp đếm tế bào xôma trong sữa nguyên liệu và sữa được bảo quản bằng hóa chất. Phương pháp này thích hợp cho việc chuẩn bị các mẫu thử chuẩn và để hiệu chuẩn quy trình đếm tế bào tự động và cơ học.

2. Định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này áp dụng định nghĩa sau đây:

2.1. Tế bào xôma: Tế bào có nhân, đó là tất cả các tế bào bạch cầu và biểu mô.

3. Nguyên tắc

Dàn đều phần mẫu sữa cần kiểm tra trên khắp phiến kính để tạo một lớp màng phim. Làm khô và nhuộm màu lớp màng này và đếm các tế bào đã được nhuộm qua kính hiển vi. Nhân số lượng tế bào đếm được trong một diện tích xác định với hệ số làm việc để có số lượng tế bào trong một mililit.

4 Thuốc thử

Cảnh báo – Tetracloetan là chất độc. Ethidi bromua cũng là độc tố. Việc chuẩn bị và sử dụng dung dịch nhuộm màu phải được thực hiện trong tủ hốt. Phải đeo găng tay bảo vệ.

Chỉ sử dụng các thuốc thử đạt chất lượng tinh khiết phân tích, trừ khi có quy định khác, và chỉ sử dụng nước cất hoặc nước đã loại ion hoặc nước có độ tinh khiết tương đương.

4.1. Dung dịch nhuộm màu

4.1.1. Thành phần

CHÚ THÍCH – Bằng cách khác, có thể thay tetracloetan bằng một lượng tricloetan tương tự. Có thể dùng ethidi bromua thay cho xanh metylen [Xem TCVN 6686-3:2000 (ISO 13366-3)].

4.1.2. Chuẩn bị

Trộn etanol và tetracloetan trong lọ. Làm nóng trong nồi cách thủy (5.1) ở 65^oC. Thêm xanh metylen vào và trộn kỹ. Làm lạnh trong tủ lạnh đến 4^oC và sau đó cho thêm axit axetic băng. Rót dung dịch này vào một lọ kín qua phễu lọc thíc