Tổng quan về Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8122:2009 (ISO 22855:2008)

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8122:2009 hoàn toàn tương đương với tiêu chuẩn quốc tế ISO 22855:2008. Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định nồng độ axit benzoic và axit sorbic trong các sản phẩm rau, quả bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Đây là công cụ kỹ thuật quan trọng giúp các phòng thử nghiệm và cơ quan quản lý kiểm soát hàm lượng chất bảo quản, bảo đảm an toàn vệ sinh thực phẩm.

Điều 1: Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng axit benzoic và axit sorbic có trong:

• Các loại nước quả, nước rau nguyên chất hoặc nước quả cô đặc.
• Các sản phẩm rau, quả đã qua chế biến, đóng hộp hoặc được bảo quản bằng các phương pháp hóa lý khác nhau.
• Các sản phẩm dạng lỏng, dạng sệt hoặc dạng rắn có nguồn gốc từ rau quả.

Điều 2: Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau đây là bắt buộc phải áp dụng cùng với tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có):

• TCVN 4851 (ISO 3696): Nước dùng cho phòng thí nghiệm phân tích - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.

Điều 3: Nguyên tắc của phương pháp

Phương pháp xác định nồng độ axit benzoic và axit sorbic dựa trên các nguyên lý kỹ thuật sau:

• Chiết xuất mẫu: Tiến hành giải phóng và chiết xuất axit benzoic và axit sorbic từ phần mẫu thử bằng dung dịch đệm hoặc dung môi thích hợp, tùy thuộc vào trạng thái vật lý và đặc tính của mẫu thực phẩm.
• Làm sạch dịch chiết: Thực hiện quá trình lọc hoặc làm trong dịch chiết để loại bỏ hoàn toàn các tạp chất hữu cơ, chất béo hoặc chất lơ lửng có thể gây ảnh hưởng đến cột sắc ký và kết quả phân tích.
• Phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC): Tiêm một thể tích chính xác dịch chiết đã làm sạch vào hệ thống HPLC. Quá trình phân tách các chất được thực hiện trên cột pha đảo (reversed-phase column) với pha động thích hợp.
• Phát hiện và định lượng: Sử dụng detector tử ngoại (UV) ở bước sóng tối ưu (thường từ 225 nm đến 235 nm đối với axit benzoic và từ 250 nm đến 260 nm đối với axit sorbic) để phát hiện các chất. Hàm lượng của từng axit được tính toán dựa trên diện tích pic hoặc chiều cao pic thu được so với đường chuẩn của các chất chuẩn tương ứng.

Điều 4: Thuốc thử và vật liệu thử

Trong quá trình phân tích, chỉ sử dụng các thuốc thử có cấp độ tinh khiết phân tích và nước sử dụng phải đạt tiêu chuẩn tối thiểu là loại 3 theo quy định tại TCVN 4851 (ISO 3696):

• Nước: Phù hợp với loại 3 của tiêu chuẩn ISO 3696 để tránh lẫn tạp chất ion.
• Methanol (CH3OH): Loại chuyên dụng dùng cho sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC grade).
• Pha động (Mobile phase): Hỗn hợp dung dịch đệm axetat hoặc phosphat kết hợp với methanol hoặc axetonitril, được điều chỉnh đến trị số pH tối ưu nhằm đảm bảo khả năng phân tách tốt nhất giữa axit benzoic và axit sorbic.
• Chất chuẩn axit benzoic (C7H6O2): Có độ tinh khiết tối thiểu đạt 99%.
• Chất chuẩn axit sorbic (C6H8O2): Có độ tinh khiết tối thiểu đạt 99%.
• Dung dịch chuẩn gốc: Được chuẩn bị bằng cách cân và hòa tan một lượng chính xác chất chuẩn axit benzoic và axit sorbic trong methanol hoặc dung dịch đệm để đạt được nồng độ đích xác định.
• Dung dịch chuẩn làm việc: Được pha loãng từ dung dịch chuẩn gốc bằng pha động hoặc dung môi phù hợp nhằm xây dựng đường chuẩn phục vụ cho quá trình định lượng.