Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 5287:1994 do Bộ Khoa học Công nghệ và Môi trường ban hành, quy định các phương pháp thử vi sinh vật đối với sản phẩm thủy sản đông lạnh. Đây là văn bản kỹ thuật quan trọng nhằm kiểm soát chất lượng vệ sinh an toàn thực phẩm đối với các mặt hàng thủy sản xuất khẩu và tiêu dùng nội địa. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung phần mở đầu và các điều khoản đầu tiên từ Điều 1 đến Điều 4 của tiêu chuẩn này.

- Điều 1: Phạm vi áp dụng của tiêu chuẩn

• Tiêu chuẩn này quy định các phương pháp xác định các chỉ tiêu vi sinh vật trong thủy sản đông lạnh bao gồm: tổng số vi sinh vật hiếu khí, Coliforms, Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus, Salmonella và Vibrio cholerae.
• Đối tượng áp dụng bao gồm các cơ sở sản xuất, chế biến, kinh doanh thủy sản đông lạnh và các cơ quan, phòng thử nghiệm kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm thủy sản tại Việt Nam.

- Điều 2: Các tiêu chuẩn viện dẫn liên quan

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, cần phối hợp viện dẫn các tiêu chuẩn Việt Nam khác về phương pháp lấy mẫu thủy sản, phương pháp chuẩn bị mẫu thử vi sinh vật và các quy định chung về an toàn phòng thí nghiệm vi sinh vật học.
• Các tài liệu viện dẫn bao gồm các TCVN về phương pháp lấy mẫu thủy sản đông lạnh và hướng dẫn chung về đếm vi sinh vật nhằm đảm bảo tính thống nhất trong quá trình thực hiện.

- Điều 3: Quy định về lấy mẫu và chuẩn bị mẫu thử

• Quy trình lấy mẫu: Việc lấy mẫu phải được tiến hành theo đúng quy định hiện hành đối với sản phẩm thủy sản đông lạnh, đảm bảo tính đại diện của lô hàng và tránh nhiễm chéo từ môi trường bên ngoài.
• Vận chuyển và bảo quản mẫu: Mẫu sau khi lấy phải được bảo quản trong điều kiện lạnh (nhiệt độ tương đương với trạng thái đông lạnh của sản phẩm) và chuyển ngay về phòng thí nghiệm để tiến hành phân tích trong thời gian ngắn nhất nhằm giữ nguyên trạng thái vi sinh vật ban đầu.
• Chuẩn bị mẫu thử: Tiến hành rã đông mẫu ở điều kiện nhiệt độ thích hợp (thường là rã đông chậm ở nhiệt độ từ 0 đến 4 độ C hoặc rã đông nhanh tùy theo yêu cầu kỹ thuật cụ thể) để không làm ảnh hưởng đến mật độ vi sinh vật hiện có trong mẫu.
• Đồng nhất mẫu: Cân một lượng mẫu xác định (thường là 25g) trong điều kiện vô trùng, sau đó đồng nhất với dung dịch pha loãng thích hợp (như nước peptone đệm) bằng máy dập mẫu hoặc máy nghiền đồng nhất để tạo ra dung dịch mẫu ban đầu (thập phân thứ nhất).

- Điều 4: Thiết bị, dụng cụ và môi trường hóa chất

• Thiết bị và dụng cụ phòng thí nghiệm: Yêu cầu sử dụng các thiết bị đã được hiệu chuẩn và khử trùng nghiêm ngặt bao gồm: tủ ấm duy trì nhiệt độ ổn định, nồi hấp tiệt trùng (autoclave), tủ sấy, máy dập mẫu (stomacher), cân phân tích có độ chính xác cao, pipet vô trùng, đĩa Petri và các dụng cụ thủy tinh chuyên dụng khác.
• Môi trường nuôi cấy và hóa chất: Các loại môi trường dinh dưỡng, hóa chất và thuốc thử dùng trong quá trình thử nghiệm phải đảm bảo chất lượng tinh khiết, được pha chế và tiệt trùng đúng quy trình kỹ thuật. Một số môi trường cơ bản bao gồm: thạch đếm đĩa (PCA), nước peptone đệm (BPW), các môi trường chọn lọc và phân biệt cho từng loại vi sinh vật mục tiêu.
• Yêu cầu vô trùng: Toàn bộ thao tác chuẩn bị môi trường, dụng cụ và quá trình thử nghiệm phải được thực hiện trong buồng cấy vô trùng (tủ an toàn sinh học) nhằm ngăn ngừa sự nhiễm bẩn từ môi trường vào mẫu thử hoặc ngược lại, bảo đảm tính chính xác của kết quả thử nghiệm.