Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-20:2014 do Viện Thú y biên soạn, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. Tiêu chuẩn này quy định quy trình chẩn đoán bệnh đóng dấu lợn, một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm do vi khuẩn Erysipelothrix rhusiopathiae gây ra.

Điều 1: Phạm vi áp dụng

• Tiêu chuẩn này quy định quy trình chẩn đoán lâm sàng và chẩn đoán phòng thí nghiệm đối với bệnh đóng dấu lợn (Swine erysipelas).
• Đối tượng áp dụng bao gồm các cơ quan quản lý chuyên ngành thú y, các phòng thử nghiệm, chẩn đoán bệnh động vật và các tổ chức, cá nhân có liên quan đến việc giám sát, phát hiện và xử lý dịch bệnh đóng dấu lợn trên phạm vi cả nước.

Điều 2: Tài liệu viện dẫn

• Các tài liệu viện dẫn trong tiêu chuẩn này là cực kỳ cần thiết cho việc áp dụng một cách chính xác quy trình chẩn đoán.
• Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). Các tài liệu này liên quan chặt chẽ đến quy trình lấy mẫu, bảo quản mẫu và các quy định chung về an toàn sinh học trong phòng thí nghiệm thú y.

Điều 3: Thuật ngữ và định nghĩa

Tiêu chuẩn này sử dụng thuật ngữ và định nghĩa liên quan đến bệnh đóng dấu lợn:

• Bệnh đóng dấu lợn (Swine erysipelas): Là bệnh truyền nhiễm cấp tính, á cấp tính hoặc mãn tính của lợn, đặc trưng bởi các vết đỏ hình dấu rìu, hình vuông hoặc hình thoi trên da (thể á cấp tính), viêm khớp mãn tính hoặc viêm nội tâm mạc (thể mãn tính), và nhiễm trùng huyết nặng (thể cấp tính).
• Erysipelothrix rhusiopathiae: Là tác nhân gây bệnh chính, là loại trực khuẩn hình que nhỏ, thẳng hoặc hơi cong, Gram dương, không di động, không sinh nha bào.

Điều 4: Thiết bị, dụng cụ, hóa chất và thuốc thử

Để thực hiện quy trình chẩn đoán bệnh đóng dấu lợn, phòng thí nghiệm cần được trang bị đầy đủ các thiết bị, dụng cụ và hóa chất chuyên dụng sau:

• Thiết bị và dụng cụ phòng thí nghiệm:
• Kính hiển vi quang học có độ phóng đại tối thiểu 1000 lần (vật kính dầu) để quan sát hình thái vi khuẩn.
• Tủ ấm có khả năng duy trì nhiệt độ ổn định ở mức 37 độ C (sai số cho phép cộng trừ 1 độ C).
• Nồi hấp tiệt trùng (Autoclave) dùng để khử trùng dụng cụ và môi trường nuôi cấy.
• Tủ an toàn sinh học cấp II để đảm bảo an toàn cho kỹ thuật viên trong quá trình thao tác với bệnh phẩm.
• Các dụng cụ phụ trợ khác bao gồm: đèn cồn, que cấy, lam kính, lá kính, ống nghiệm, đĩa Petri vô trùng, panh, kéo phẫu thuật vô trùng.
• Hóa chất, môi trường nuôi cấy và thuốc thử:
• Môi trường nuôi cấy cơ bản và chuyên dụng: Thạch máu (Blood agar) bổ sung máu ngựa hoặc máu cừu vô trùng; canh thang dinh dưỡng (Nutrient broth) hoặc canh thang tim não (Brain Heart Infusion - BHI).
• Bộ thuốc nhuộm Gram (bao gồm dung dịch tím kết tinh, dung dịch lugol, cồn 95 độ và dung dịch đỏ safranin hoặc fuchsine) để xác định đặc tính bắt màu của vi khuẩn.
• Kháng huyết thanh chuẩn hoặc các kít thử nhanh phục vụ cho phản ứng ngưng kết hoặc định danh vi khuẩn.
• Nước cất vô trùng và dung dịch muối sinh lý vô trùng (NaCl 0,9%).