Giới thiệu chung về Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6837:2007 (ISO 11868:2007)

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6837:2007 hoàn toàn tương đương với tiêu chuẩn quốc tế ISO 11868:2007. Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định hàm lượng lactuloza trong sữa đã xử lý nhiệt. Đây là phương pháp phân tích kỹ thuật cao, giúp đánh giá chính xác mức độ tác động của nhiệt độ lên sản phẩm sữa, từ đó phân biệt các loại sữa thương phẩm và kiểm soát chất lượng sản phẩm.

- Điều 1: Phạm vi áp dụng

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng lactuloza trong sữa đã xử lý nhiệt bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
• Đối tượng áp dụng bao gồm các loại sữa đã qua quá trình xử lý nhiệt như sữa thanh trùng (pasteurized milk), sữa tiệt trùng UHT (UHT milk) và sữa tiệt trùng trong bao bì (sterilized milk).
• Phương pháp này được thiết kế đặc biệt nhằm mục đích phân biệt các loại sữa xử lý nhiệt khác nhau, dựa trên sự thay đổi hàm lượng lactuloza sinh ra do tác động của nhiệt độ trong quá trình chế biến.

- Điều 2: Tài liệu viện dẫn

• Việc áp dụng tiêu chuẩn này đòi hỏi phải viện dẫn các tài liệu kỹ thuật cốt lõi để đảm bảo tính đồng bộ và chính xác của phép thử.
• Tài liệu viện dẫn bắt buộc là TCVN 4851 (ISO 3696) - Nước dùng cho phòng thử nghiệm phân tích - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.
• Đối với các tài liệu viện dẫn có ghi năm công bố, các phiên bản được nêu sẽ được áp dụng. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố, phiên bản mới nhất (bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung) sẽ được áp dụng.

- Điều 3: Thuật ngữ và định nghĩa

• Tiêu chuẩn đưa ra định nghĩa thống nhất cho chỉ tiêu đo lường cốt lõi:
• Hàm lượng lactuloza trong sữa xử lý nhiệt: Là phần khối lượng của lactuloza được xác định theo phương pháp quy định trong tiêu chuẩn này.
• Đơn vị đo lường và biểu thị kết quả của hàm lượng lactuloza được tính bằng miligam trên lít (mg/l) sữa.

- Điều 4: Nguyên tắc của phương pháp

• Phương pháp phân tích dựa trên quy trình kỹ thuật chuẩn hóa gồm các bước cơ bản sau:
• Kết tủa protein và chất béo: Mẫu sữa ban đầu được xử lý bằng các thuốc thử kết tủa (thường là thuốc thử Carrez) để loại bỏ hoàn toàn protein và chất béo ra khỏi dung dịch mẫu, tránh gây tắc nghẽn hoặc làm hỏng cột sắc ký.
• Lọc mẫu: Hỗn hợp sau khi kết tủa được tiến hành lọc hoặc ly tâm để thu lấy phần dịch lọc trong suốt chứa lactuloza tự do.
• Phân tích sắc ký (HPLC): Dịch lọc thu được sau đó được bơm vào hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao. Quá trình phân tách lactuloza ra khỏi các thành phần đường khác (như lactoza) được thực hiện trên cột sắc ký thích hợp (ví dụ: cột trao đổi ion hoặc cột silica liên kết pha tĩnh).
• Phát hiện và định lượng: Sử dụng detector chỉ số khúc xạ (Refractive Index Detector - RID) hoặc detector thích hợp khác để phát hiện sự xuất hiện của lactuloza. Hàm lượng lactuloza được tính toán định lượng bằng phương pháp ngoại chuẩn, so sánh diện tích pic hoặc chiều cao pic của mẫu thử với pic của dung dịch chuẩn lactuloza đã biết trước nồng độ.