Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12787:2019 về Thuốc bảo vệ thực vật - Xác định hàm lượng hoạt chất Niclosamide được công bố bởi Bộ Khoa học và Công nghệ, quy định phương pháp chuẩn hóa nhằm xác định chính xác hàm lượng hoạt chất niclosamide trong các sản phẩm kỹ thuật và thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật tại Việt Nam.

Phạm vi áp dụng và đối tượng điều chỉnh

Tiêu chuẩn này áp dụng đối với việc kiểm tra, đánh giá chất lượng thuốc bảo vệ thực vật có chứa hoạt chất niclosamide, bao gồm niclosamide kỹ thuật và các dạng thuốc thành phẩm (như dạng bột thấm nước WP, dạng huyền phù SC, dạng nhũ dầu EC, và các dạng phối hợp khác). Đối tượng áp dụng là các phòng thử nghiệm, cơ quan quản lý chất lượng và các tổ chức, cá nhân sản xuất, kinh doanh, nhập khẩu thuốc bảo vệ thực vật tại Việt Nam.

Nguyên tắc của phương pháp xác định

• Hàm lượng hoạt chất niclosamide được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector tử ngoại (UV).
• Quá trình định lượng được thực hiện bằng cách so sánh diện tích hoặc chiều cao pic của hoạt chất trong dung dịch mẫu thử với dung dịch chuẩn có nồng độ đã biết.

Hóa chất, thuốc thử và thiết bị dụng cụ

• Hóa chất và chất chuẩn: Chất chuẩn niclosamide đã biết trước hàm lượng; các dung môi đạt tiêu chuẩn dùng cho sắc ký lỏng như axetonitril, metanol, nước cất hai lần hoặc nước dùng cho HPLC; các chất điều chỉnh pH như axit photphoric hoặc axit axetic.
• Thiết bị và dụng cụ: Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) trang bị detector UV hoặc DAD; cột phân tích pha đảo (thường là cột C18 hoặc tương đương); cân phân tích có độ chính xác đến 0,1 mg; máy lắc siêu âm; bộ lọc mẫu chuyên dụng và các dụng cụ thủy tinh phòng thí nghiệm thông thường.

Quy trình tiến hành thử nghiệm

• Chuẩn bị dung dịch chuẩn: Cân một lượng chất chuẩn niclosamide chính xác vào bình định mức, hòa tan bằng dung môi thích hợp (thường là hỗn hợp axetonitril và nước hoặc metanol) và dùng sóng siêu âm để hòa tan hoàn toàn, sau đó định mức đến vạch để thu được dung dịch chuẩn làm việc.
• Chuẩn bị dung dịch thử: Cân một lượng mẫu thử (kỹ thuật hoặc thành phẩm) chứa lượng hoạt chất tương đương với lượng chất chuẩn, hòa tan và định mức bằng cùng loại dung môi như dung dịch chuẩn, tiến hành lọc qua màng lọc trước khi bơm vào hệ thống HPLC.
• Điều kiện vận hành hệ thống HPLC: Thiết lập các thông số tối ưu bao gồm pha động (tỷ lệ axetonitril/nước có axit hóa), tốc độ dòng, nhiệt độ cột, bước sóng phát hiện (thường ở khoảng 290 nm đến 330 nm tùy thuộc vào điều kiện cụ thể) và thể tích bơm mẫu.
• Tiến hành đo: Bơm lần lượt dung dịch chuẩn và dung dịch thử vào hệ thống sắc ký cho đến khi diện tích pic của các lần bơm lặp lại đạt độ ổn định theo quy định.

Tính toán kết quả và sai số cho phép

• Hàm lượng hoạt chất niclosamide (tính bằng phần trăm khối lượng) được tính toán dựa trên công thức so sánh tỷ lệ diện tích pic của mẫu thử và mẫu chuẩn, có tính đến độ tinh khiết của chất chuẩn và khối lượng mẫu cân.
• Độ lệch chuẩn cho phép giữa các kết quả xác định song song không được vượt quá giới hạn quy định đối với từng khoảng hàm lượng hoạt chất cụ thể theo tiêu chuẩn ngành.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12787:2019 có hiệu lực kể từ ngày ban hành, tạo cơ sở pháp lý và kỹ thuật thống nhất cho công tác kiểm định chất lượng thuốc bảo vệ thực vật trên toàn quốc.