TIÊU CHUẨN VIỆT NAM

TCVN 6686-3 : 2000

ISO 13366-3 : 1997

SỮA - ĐỊNH LƯỢNG TẾ BÀO XÔMA - PHẦN 3: PHƯƠNG PHÁP HUỲNH QUANG ĐIỆN TỬ

Milk - Enumeration of somatic cells - Part 3: Fluoro-opto-electronic method

Lời nói đầu

TCVN 6686-3:2000 hoàn toàn tương đương với ISO 13366-3:1997

TCVN 6686 - 3:2000 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F12 Sữa và sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn - Đo lường - Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học, Công nghệ và Môi trường ban hành.

SỮA - ĐỊNH LƯỢNG TẾ BÀO XÔMA - PHẦN 3: PHƯƠNG PHÁP HUỲNH QUANG ĐIỆN TỬ

Milk - Enumeration of somatic cells - Part 3: Fluoro-opto-electronic method

Cảnh báo - Khi áp dụng tiêu chuẩn này có thể liên quan đến các chất liệu, thiết bị và các thao tác nguy hiểm. Tiêu chuẩn này không đề cập đến các vấn đề an toàn khi sử dụng chúng. Người sử dụng tiêu chuẩn này phải tự thiết lập các thao tác an toàn thích hợp và xác định khả năng áp dụng các giới hạn quy định trước khi sử dụng tiêu chuẩn.

1. Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp đếm tế bào xôma có trong sữa nguyên liệu và sữa được bảo quản bằng hóa chất, sử dụng thiết bị đếm bằng huỳnh quang điện tử [1]⁾.

Chú thích - Các mẫu chưa bảo quản trong vòng 24 h sau khi lấy mẫu có thể cho số đếm tế bào kết quả không chính xác nếu dùng thiết bị đời cũ (thí dụ, Fossamtic 90 và 215).

2. Định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này áp dụng định nghĩa sau đây:

2.1. Tế bào xôma: Tế bào có độ phát huỳnh quang nhỏ nhất do nhuộm màu DNA trong nhân của chúng.

3. Nguyên tắc

Trộn mẫu sữa cần kiểm tra với dung dịch đệm và dung dịch nhuộm màu. Chuyển hỗn này ở dạng màng phim sang một đĩa quay, làm chức năng vật kính phẳng đối với kính hiển vi. Mỗi tế bào đã nhuộm màu tạo một xung điện được quan sát qua kính hiển vi, các xung điện đó được khuyếch đại và ghi lại. Đọc trực tiếp số lượng hàng ngàn tế bào xôma trong 1 mililit.

4. Thuốc thử

Cảnh báo - Ethidi bromua là chất độc. Việc chuẩn bị và sử dụng các dung dịch cơ bản và dung dịch làm việc phải thực hiện trong tủ hốt. Sử dụng găng tay bảo vệ.

Chỉ sử dụng các thuốc thử đạt chất lượng tinh khiết phân tích, trừ khi có quy định khác và chỉ sử dụng nước cất hoặc nước đã loại ion hoặc nước có độ tinh khiết tương đương.

4.1. Các dung dịch cơ bản

4.1.1. Dung dịch đệm nhuộm màu

4.1.1.1. Thành phần

4.1.1.2. Chuẩn bị

Hòa tan ethidi bromua trong 1 lít nước đựng trong bình dung tích 5 lít. Khuấy nhẹ cho đến khi hòa tan hết ethidi bromua. Có thể làm tan nhanh bằng