Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7260:2003 (hoàn toàn tương đương với báo cáo kỹ thuật ISO/TR 8452:1992) quy định phương pháp xác định dư lượng clorophyl (hay còn gọi là chỉ số xanh) trong thuốc lá nguyên liệu. Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung phần mở đầu và các điều khoản đầu tiên (từ Điều 1 đến Điều 4) của tiêu chuẩn này:

1. Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Tiêu chuẩn này quy định phương pháp thực nghiệm để xác định hàm lượng clorophyl còn lại trong thuốc lá nguyên liệu sau quá trình sấy và xử lý.
• Chỉ số xanh (dư lượng clorophyl) là một chỉ tiêu kỹ thuật quan trọng giúp đánh giá độ chín của lá thuốc lá, mức độ hoàn thành của quá trình sấy (đặc biệt là sấy vàng) và phân loại chất lượng thương mại của nguyên liệu.

2. Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Để áp dụng tiêu chuẩn này một cách chính xác, cần viện dẫn và phối hợp với các tiêu chuẩn quốc gia và quốc tế liên quan đến phương pháp lấy mẫu thuốc lá nguyên liệu.
• Các quy trình chuẩn bị mẫu thử nghiệm phải tuân thủ nghiêm ngặt các tiêu chuẩn kỹ thuật hiện hành để đảm bảo tính đại diện và độ đồng nhất của mẫu phân tích.

3. Nguyên tắc của phương pháp (Điều 3)

• Chiết xuất clorophyl: Mẫu thuốc lá nguyên liệu sau khi được làm khô và nghiền nhỏ đến độ mịn quy định sẽ được chiết xuất bằng dung môi hữu cơ thích hợp (thường sử dụng axeton hoặc hỗn hợp dung môi chuyên dụng) để hòa tan hoàn toàn lượng clorophyl còn lại.
• Đo phổ hấp thụ: Dung dịch chiết thu được sau quá trình lọc sẽ được đem đo độ hấp thụ quang học bằng máy quang phổ tại các bước sóng đặc trưng (vùng ánh sáng đỏ, nơi clorophyl có độ hấp thụ cực đại).
• Xác định kết quả: Dựa trên các trị số mật độ quang đo được ở các bước sóng quy định, tiến hành tính toán hàm lượng clorophyl tổng số (hoặc chỉ số xanh) thông qua các công thức toán học và hệ số thực nghiệm được thiết lập sẵn.

4. Thuốc thử và thiết bị dụng cụ (Điều 4)

• Yêu cầu về thuốc thử: Tất cả các hóa chất và dung môi sử dụng trong quá trình phân tích phải đạt độ tinh khiết phân tích (độ tinh khiết hóa học cao). Dung môi chiết xuất (như axeton) phải được kiểm tra để không lẫn các tạp chất gây ảnh hưởng đến kết quả đo quang phổ.
• Yêu cầu về thiết bị:
  • Máy đo phổ hấp thụ phân tử (máy quang phổ) có khả năng đo chính xác độ hấp thụ ở các bước sóng yêu cầu với độ lặp lại cao.
  • Máy nghiền phòng thí nghiệm phù hợp để nghiền mẫu thuốc lá mà không làm sinh nhiệt quá mức gây phân hủy clorophyl.
  • Các dụng cụ thủy tinh tiêu chuẩn bao gồm bình định mức, phễu lọc, ống đong và pipet đã được hiệu chuẩn.