Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 13286:2021 về Chế phẩm enzym - Xác định hoạt độ glucoamylase bằng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F2 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị và được Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. Tiêu chuẩn này quy định phương pháp chuẩn hóa nhằm xác định chính xác hoạt lực của enzym glucoamylase trong các chế phẩm enzym thương mại phục vụ cho ngành công nghiệp thực phẩm và các lĩnh vực sản xuất liên quan.

Phạm vi áp dụng và đối tượng sử dụng

Tiêu chuẩn này áp dụng đối với các cơ quan kiểm nghiệm, phòng thí nghiệm phân tích vi sinh và hóa sinh, các doanh nghiệp sản xuất, nhập khẩu và kinh doanh chế phẩm enzym glucoamylase tại Việt Nam. Phương pháp này được thiết kế để đánh giá chất lượng và hoạt tính sinh học của enzym glucoamylase trong các điều kiện thí nghiệm tiêu chuẩn.

Nội dung cốt lõi của các điều khoản đầu (Từ Điều 1 đến Điều 4)

1. Phạm vi áp dụng (Điều 1)

• Quy định chi tiết phương pháp định lượng hoạt độ glucoamylase trong các chế phẩm enzym bằng kỹ thuật đo quang phổ hấp thụ phân tử.
• Phương pháp này áp dụng cho các chế phẩm enzym dạng bột hoặc dạng lỏng có nguồn gốc từ vi sinh vật (chủ yếu là từ các chủng nấm mốc như Aspergillus niger).

2. Tài liệu viện dẫn (Điều 2)

• Tiêu chuẩn nhấn mạnh việc áp dụng các tài liệu viện dẫn kỹ thuật liên quan để đảm bảo tính đồng bộ trong thao tác thí nghiệm.
• Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).

3. Thuật ngữ và định nghĩa (Điều 3)

• Hoạt độ glucoamylase (Glucoamylase activity): Là khả năng của enzym xúc tác quá trình thủy phân liên kết alpha-1,4-glucosidic và alpha-1,6-glucosidic từ đầu không khử của chuỗi tinh bột để giải phóng glucose.
• Đơn vị hoạt độ glucoamylase (U): Được định nghĩa là lượng enzym cần thiết để giải phóng 1 micromol (µmol) glucose từ cơ chất tinh bột hòa tan trong thời gian 1 phút dưới các điều kiện thử nghiệm tiêu chuẩn (thường ở nhiệt độ 40 độ C hoặc 50 độ C và pH tối thích tùy thuộc vào quy trình cụ thể).

4. Nguyên tắc của phương pháp (Điều 4)

• Quá trình phân tích dựa trên phản ứng thủy phân cơ chất tinh bột hòa tan bởi enzym glucoamylase trong mẫu thử ở điều kiện nhiệt độ và pH được kiểm soát nghiêm ngặt.
• Lượng glucose giải phóng ra sau phản ứng thủy phân sẽ tác dụng với các chất phản ứng tạo màu đặc trưng. Hai phương pháp tạo màu phổ biến thường được áp dụng là phương pháp sử dụng thuốc thử axit dinitrosalicylic (DNS) hoặc phương pháp enzym glucose oxidase - peroxidase (GOD-POD).
• Độ hấp thụ quang của dung dịch màu sau phản ứng được đo bằng máy quang phổ hấp thụ phân tử ở bước sóng xác định (ví dụ: 540 nm đối với phương pháp DNS hoặc 505 nm đối với phương pháp GOD-POD).
• Hàm lượng glucose sinh ra được tính toán dựa trên đường dựng sẵn (đường chuẩn) của glucose tinh khiết, từ đó quy đổi ra hoạt độ glucoamylase của chế phẩm enzym ban đầu.

Hiệu lực thi hành

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 13286:2021 có hiệu lực thi hành kể từ ngày được Bộ Khoa học và Công nghệ công bố ban hành. Tiêu chuẩn này là căn cứ kỹ thuật pháp lý quan trọng để các cơ quan chức năng kiểm tra chất lượng sản phẩm enzym lưu thông trên thị trường, đồng thời giúp các doanh nghiệp nâng cao năng lực kiểm soát chất lượng quy trình sản xuất.